Diversity of pectobacterium strains by biochemical, physiological, and molecular characterization / Diversidade de cepas de Pectobacterium por caracterização bioquímica, fisiológica e molecular

Pectobacterium is a complex taxon of strains with diverse characteristics. It comprises several genera, including Erwinia, Brenneria, Pectobacterium, Dickeya, and Pantoea. Pectobacterium and Dickeya cause diseases in a wide range of plants, including potatoes, where they are causative agents of soft rot in tubers and blackleg in field-grown plants.Characterizing Pectobacterium species allows for the analysis of the diversity of pectinolytic bacteria, which may support control strategies for plant bacterial diseases. The aim of this study was to perform biochemical, physiological, and molecular characterizations of Pectobacteriumspp. from different sites and host plants. The isolated strains were characterized by the glucose fermentation test, Gram staining, catalase activity, oxidase activity, growth at 37 ºC, reducing substances from sucrose, phosphatase activity, indole production, acid production from different sources (sorbitol, melibiose, citrate, and lactose), pathogenicity in potato, and hypersensitivity reactions. Molecular characterization was performed with species-specific primers ECA1f/ECA2r and EXPCCF/EXPCCR, which identify P.atrosepticum and P.carotovorum subsp. carotovorum (Pcc), respectively, and with primers 1491f/L1RA/L1RG and Br1f/L1RA/L1RG that differentiate Pcc from Dickeya chrysanthemi and from P. carotovorum subsp. brasiliensis. The strains were identified as belonging to the genus Pectobacterium, though they did not fit the biochemical nor the molecular classification standards for subspecies differentiation, indicating significant diversity among the strains.

Pectobacterium é um táxon complexo de isolados bacterianos com características diversas. Compreende vários gêneros como Erwinia, Brenneria, Pectobacterium, Dickeya e Pantoea. Pectobacterium e Dickeya causam doenças em ampla variedade de plantas, incluindo a batateira, na qual são os agentes etiológicos da podridão mole dos tubérculos e da canela-preta de plantas cultivadas em campo.A caracterização de espécies de Pectobacterium permite a análise da diversidade de bactérias pectolíticas, podendo auxiliar estratégias de controle de doenças bacterianas em plantas. O objetivo deste trabalho foi caracterizar bioquímica, fisiológica e molecularmente isolados de Pectobacterium sp. provenientes de diferentes locais e hospedeiros. Os isolados foram caracterizados pelos testes de fermentação de glicose, Gram, catalase, oxidase, crescimento à 37 ºC, redução de substâncias a partir de sacarose, atividade da fosfatase, produção de indol, produção de ácido a partir de sorbitol, melibiose, citrato e lactose, patogenicidade em batata e reação de hipersensibilidade. Para a caracterização molecular, foram utilizados os pares de primersECA1f/ECA2r e EXPCCF/EXPCCR [específicos para P. atrosepticum e P.carotovorum subsp. carotovorum(Pcc), respectivamente] e as tríades de primers 1491f/L1RA/L1RG e Br1f/L1RA/L1RG, para diferenciar Pcc de Dickeya chrysanthemi e de P. carotovorum subsp. brasiliensis. Os isolados foram identificados como pertencentes ao gênero Pectobacterium, no entanto, não se enquadraram na classificação bioquímica e tampouco molecular para diferenciação das subespécies, demonstrando a grande diversidade dos mesmos.

Regulators, culture media and types of lights in vitro lavender culture / Reguladores, meios de cultura e tipos de luzes na cultura de lavanda in vitro

ABSTRACT: Lavender is an aromatic ornamental plant that is used widely in the perfume, pharmaceutical, cosmetical and food industries. That is why it is important to study ways to promote a production of lavender raw material. For this, four experiments were carried out in order to study the germination and initial in vitro development of lavender. In the first part the efficiency of the use of hydrogen peroxide in the pre-treatment of seeds inoculated in culture media with different concentrations of gibberellic acid was evaluated. Besides that, the influence of the use of Growlux lamps and white fluorescent lamps on plantlets cultivated in MS and LS media at salts concentrations of 50 and 100% was evaluated. Finally, the effect of the gibberellic acid, putrescine, spermine and spermidine in different concentrations was evaluated. Better results were estimated when hydrogen peroxide pretreatment was applied to the seeds with subsequent inoculation in a medium containing 2,5 mg L-1 of gibberellic acid. The use of Growlux lamps did not influence the characteristics observed when compared to the use of white fluorescent lamps, however it was concluded that the species develops more in a LS medium. Concerning the use of polyamines was found that germination, aerial part and number of leaves of the seedlings were generally favored at the concentration of 0,5 mg L-1 except when spermine was applied, which resulted in a lower number of leaves under this condition.

RESUMO: Lavanda é uma planta ornamental aromática que é amplamente utilizada nas indústrias de perfumaria, farmacêutica, cosmética e alimentícia e por isso é importante estudar maneiras de promover a produção dessa matéria-prima. Para tanto, foram realizados quatro experimentos com o objetivo de estudar a germinação e o desenvolvimento inicial in vitro da lavanda. No primeiro experimento testou-se a eficiência do uso de peróxido de hidrogênio no pré-tratamento de sementes inoculadas em meios de cultura com diferentes concentrações de ácido giberélico. Além disso, foi avaliado a influência do uso de lâmpadas Growlux e de lâmpadas fluorescentes brancas em plântulas cultivadas nos meios MS e LS em concentrações de sais de 50 e 100%. Por fim, também estudou-se o efeito dos reguladores ácido giberélico, putrescina, espermina e espermidina em diferentes concentrações. Melhores resultados foram encontrados quando o pré-tratamento com peróxido de hidrogênio foi aplicado às sementes com posterior inoculação em meio contendo 2,5 mg L-1 de ácido giberélico. O uso de lâmpadas Growlux não influenciou as características avaliadas quando comparado ao uso de lâmpadas fluorescentes brancas, entretanto observou-se que as espécies se desenvolvem melhor em meio LS. Com relação ao uso de poliaminas, verificou-se que a germinação, parte aérea e número de folhas das plântulas foram favorecidas na concentração de 0,5 mg L-1, exceto quando se aplicou espermina, que resultou em menor número de folhas nessa condição.

Reaction of brazilian cotton genotypes to white mold depends on pathogen aggressiveness and incubation conditions / Reação de genótipos brasileiros de algodoeiro ao mofo branco depende da agressividade do patógeno e das condições de incubação

The expansion of cotton crop into irrigated and high lands of Brazilian Cerrado, despite the possibility of increasing fiber yield, led to the occurrence of diseases previously considered secondary, such as white mold [Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary]. Host genetic resistance is of extreme importance in integrated strategies to manage this disease. Resistance of Brazilian cotton genotypes, challenged with different strains of S. sclerotiorum, under two incubation conditions for disease progress was evaluated. In addition, possible correlation between oxalic acid and straw test methods to rank the genotypes was evaluated. Artificial inoculation was done when cotton plants reached the V2phenological stage with fungi isolated from naturally infected soybean (ScS) or cotton (ScC) commercial crops. Control plants were inoculated with culture medium. After inoculation, plants were kept for one week either in a growth chamber or in greenhouse and evaluated for disease symptoms and severity. The oxalic acid test consisted of stem submersion of rootless cotton plants in a 2-cm layer of 20 or 40 mM solutions for 20, 44 or 68 h. A wilting scale was used to distinguish genotype's sensibility to the acid. The data were submitted to individual, joint, and multivariate analysis, grouping cotton genotypes by the Scott-Knott's test (p < 0.05), the hierarchical UPGMA and the non-hierarchical Tocher methods. Difference in aggressiveness between strains was identified, in which ScC led to greater disease severity. This result suggests a possible physiological specialization ofS. sclerotiorum to different hosts. It was observed that the growth chamber environment provided more adequate conditions for S. sclerotiorum infection, thus allowing better selection of resistant cotton genotypes. UPGMA and Tocher grouping methods further confirmed that the evaluated genotypes differ from each other in resistance to white mold. No correlation between oxalic acid and straw test methods was observed.

A expansão da cultura do algodoeiro para terras altas e irrigadas do Cerrado brasileiro, apesar da possibilidade de aumentar a produção de fibras, levou à ocorrência de doenças antes consideradas secundárias, como o mofo branco [Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary]. A resistência genética do hospedeiro é de extrema importância nas estratégias de manejo integrado dessa doença. Avaliou-se a resistência de genótipos brasileiros de algodão, desafiados com diferentes isolados de S. sclerotiorum, sob duas condições de incubação para o progresso da doença. Além disso, foi avaliada a possível correlação entre os métodos do ácido oxálico e do straw test para ranquear os genótipos. A inoculação artificial foi realizada quando as plantas de algodoeiro atingiram o estágio fenológico V2, com fungos isolados de culturas comerciais de soja (ScS) ou de algodão (ScC) naturalmente infectadas. O controle consistiu de plantas inoculadas somente com meio de cultura. Após a inoculação, as plantas foram mantidas em câmara de crescimento ou em casa de vegetação durante uma semana e avaliadas quanto aos sintomas e severidade da doença. O teste do ácido oxálico consistiu na submersão da haste das plantas de algodão, após remoção das raízes, em uma solução de 20 ou 40 mM por 20, 44 ou 68 h. Uma escala visual de murcha foi usada para distinguir a sensibilidade dos genótipos ao ácido. Os dados foram submetidos à análise individual, conjunta e multivariada, agrupando os genótipos de algodoeiro pelo teste de Scott-Knott (p < 0,05) e pelos métodos UPGMA e de Tocher. Diferença na agressividade entre os isolados foi identificada, na qual ScC resultou em maior severidade da doença. Isto sugere possível especialização fisiológica de S. sclerotiorum para diferentes hospedeiros. Observou-se que o ambiente da câmara de crescimento proporcionou condições mais adequadas para infecção por S. sclerotiorum comparativamente à casa de vegetação, permitindo melhor seleção de genótipos resistentes. Os métodos de agrupamento UPGMA e Tocher confirmaram que os genótipos avaliados diferem entre si na resistência ao mofo branco. Não foi observada correlação entre o ácido oxálico e o straw test.

Application of tissue culture techniques in potato / Aplicação da cultura de tecidos vegetais em batata

Potato is the world's most important non-cereal food crop, and therefore, it is considered one of the major food sources for humankind. Its conventional propagation is asexual, by using the tuber, which allows the accumulation and dissemination of pathogens to new cultivation areas. This fact not only impairs the yield of this solanaceous plant, but also threatens the maintenance of genotypes for commercial or breeding purposes. Due to the impossibility of using botanical seed, conservation and exchange of germplasm of this species by means of conventional methods are not feasible. In all potato-producing regions, the demand for high-quality tubers has been paramount to ensure crops production. Thus, biotechnological techniques based on tissue culture are very important. Plant tissue culture offers alternative methods of propagation by in vitro techniques that provide production and multiplication of material with high sanity. Thus, this literature review summarizes the history and current situation of tissue culture techniques applied to potato crop. Besides clonal multiplication, this biotechnological tool makes available initial indexed material to breeding programs and certified seed potato, and facilitates the exchange and conservation of germplasm. For all these reasons, the use of these techniques in potato production chain directly benefits producers by providing high-quality propagules.

A batata é a cultura não-cereal mais importante do mundo e, portanto, uma das principais fontes de alimento para a humanidade. Sua multiplicação convencional é assexuada utilizando o próprio tubérculo, o que permite o acúmulo e a difusão de patógenos para novas áreas de cultivo, comprometendo a produtividade desta solanácea e ameaçando a manutenção de genótipos de interesse comercial ou para fins de melhoramento. Devido à inviabilidade de utilização das sementes botânicas, a conservação e o intercâmbio de germoplasma dessa espécie por meio de métodos convencionais torna-se inviável. Em todas as regiões produtoras de batata, a demanda por tubérculos de alta qualidade tem sido primordial para garantir a produção das lavouras. Dessa forma, técnicas biotecnológicas baseadas na cultura de tecidos são de suma importância. A cultura de tecidos vegetais oferece métodos alternativos de propagação através das técnicas in vitro que proporcionam a produção e multiplicação de material com alta sanidade. Dessa maneira, esta revisão visa sumarizar o histórico e panorama atual das aplicações da cultura de tecidos em batata. Além da multiplicação clonal, essa ferramenta biotecnológica fornece material inicial indexado para programas de melhoramento e de produção certificada de batata-semente e facilita o intercâmbio e a conservação de germoplasma. Por tudo isso, o emprego destas técnicas na cadeia produtiva da batata proporciona benefícios diretos aos produtores, uma vez que fornece material propagativo com elevada qualidade genética e fitossanitária.

Detection of Sclerotinia sclerotiorum on soybean and common bean seeds by modified neon-s test / Detecção de Sclerotinia sclerotiorum em sementes de soja e de feijão pela técnica neon-s modificada

The Neon-S method has been used for detection of Sclerotinia sclerotiorum on soybean and common bean seeds since the 2010 crop season. However, this method can lead to identification of false-positives due to the presence of other fungi that change the medium pH. Thus, this study evaluated the effect of increasing incubation period on the reliability of Neon-S test in detecting S. sclerotiorum infection on soybean and common bean seeds. A randomized block design was set up with three replicates in a 3x3 factorial scheme, consisting of three detection methods (germination paper test, Neon-S, and modified Neon-S2) and three seed material (naturally infected common beans, naturally infected and artificially inoculated soybean seeds). The three methods were compared by evaluating 400 seeds per replication, after incubating them for seven days in Neon-S, for 15 days in Neon-S2, and for 30 days in germination paper, determining the presence of the fungus and of sclerotia adhered to the seeds. The data were submitted to the analysis of variance and the averages compared by the Tukey test at 5% probability. From 2008 to 2012, 637 lots were evaluated. Among the seed material, artificially inoculated soybean presented the greatest pathogen infection index. The germination paper test led to 2.8% of positive samples, contrasting 29.7% of Neon-S. The modified method Neon-S2 increased detection sensitivity of S. sclerotiorum in seed lots (31.2%); however, did not significantly differ from the Neon-S method, despite its greater averages. We concluded that detection of S. sclerotiorum by the Neon-S method can be optimized by incubation for 15 days (Neon-S2), due to the formation of sclerotia near the infect seeds which confirms the presence of the pathogen avoiding false-positive results.

O método de Neon-S tem sido utilizado para a detecção de Sclerotinia sclerotiorum em sementes de soja e de feijão desde a safra de 2010. Porém, esse método possibilita a leitura de falsos-positivos devido ao aparecimento de fungos que também alteram o pH do meio. O objetivo deste trabalho foi verificar se o aumento do período de incubação melhora a confiabilidade do teste Neon-S em detectar o patógeno S. sclerotiorum em sementes de soja e de feijão. Utilizou-se o delineamento experimental de blocos casualizados, em esquema fatorial 3x3, sendo três métodos de detecção (rolo de papel, Neon-S e o meio modificado Neon-S2) e três tipos de sementes (feijão infectado naturalmente e sementes de soja infectadas natural ou artificialmente), totalizando nove tratamentos, com três repetições. Os três métodos foram comparados avaliando 400 sementes por repetição: em meio Neon-S com incubação de sete dias, Neon-S2 com incubação de 15 dias e em rolo de papel por 30 dias, anotando-se a presença do fungo e de escleródios aderidos às sementes. Realizou-se a análise de variância dos dados e teste de comparação de médias (Tukey 5%). No período de 2008 a 2012, 637 lotes foram testados. Dentre os tipos de sementes, a soja inoculada artificialmente apresentou os maiores índices de infecção pelo patógeno. O teste de rolo de papel apresentou 2,8% de amostras positivas, enquanto o Neon-S 29,7%. O método Neon-S2 aumentou a sensibilidade de detecção de S. sclerotiorum nos lotes de sementes analisadas (31,2%); porém, não foi detectada diferença significativa comparativamente ao método Neon-S, ainda que com maiores médias. Conlui-se que a detecção de S. sclerotiorum pelo método Neon-S pode ser otimizada com a incubação por 15 dias (Neon-S2), em virtude da formação de escleródios próximos às sementes infectadas, o que confirma a presença do patógeno e evita a leitura de falsos-positivos.

Physical-chemical properties of pesticides: concepts, applications, and interactions with the environment / Propriedades físico-químicas dos agrotóxicos: conceitos, aplicações e interações com o ambiente

What are the molecular properties of agricultural chemicals, how do they function and why should they be studied? How do they affect the agroecosystem and how are they linked to application technologies? These questions arise due to the lack of information in the literature about this issue and form the basis of the current review. In general, a better understanding of the physical-chemical characteristics of agricultural chemicals makes it possible to improve their efficiency of application, consequently reducing losses and maintaining the integrity of the environment. These points underscore the importance of this subject, which has been deeply discussed in Europe. In Brazil, there are few studies that examine the physicochemical properties of pesticides at the molecular level and virtually none that examine their impact. Thus, the current study attempts to clarify the concepts, applications, and interactions of the physical-chemical properties of agricultural chemicals with the environment. The trade secrets associated with these molecules are essential to the agrochemical industry, which certainly restricts scientific publications on the topic. Nevertheless, these properties are linked to the products' mobility in the soil, disassociation in water, bioaccumulation, persistence, and durability in the environment and on the target. In summary, the more mobile and persistent a molecule is, the greater its potential for seepage and leaching and, consequently, the greater its potential for contaminating surface, subsurface, and ground water. This type of molecule becomes more environmentally aggressive if it bioaccumulates readily and degrades slowly. It should be noted that proper handling of agrochemicals depends not only on an understanding of their molecular properties, but also on their safe application. These concepts are essential for the successful promotion and sustainable use of these products in rural areas.

Quais são, como e por que estudar as propriedades moleculares de agrotóxicos? Quais seus impactos no agroecossistema? Como associá-las à tecnologia de aplicação? Estes questionamentos são decorrentes da escassez literária sobre o tema e são a base argumentativa desta revisão. De maneira geral, o conhecimento das características físico-químicas dos agrotóxicos possibilita aumentar a eficiência e reduzir as perdas dos produtos no ato da aplicação, o que se associa às predições de sucesso desta aplicação e, consequentemente, à manutenção da integridade ambiental. Estes aspectos ressaltam a importância do tema, há muito discutido na Europa. No Brasil, são poucas as pesquisas relacionadas às propriedades físico-químicas dos agrotóxicos, intrínsecas a cada molécula, e praticamente inexistentes as discussões sobre seus impactos. Por isto, esta revisão visa elucidar conceitos, aplicações e interações das propriedades físico-químicas de agrotóxicos com o ambiente. Indiscutivelmente, os segredos comerciais relacionados às moléculas são o grande arcabouço da indústria de agrotóxico, o que certamente restringe publicações científicas na área. Contudo, sabe-se que estas propriedades estão associadas à mobilidade dos produtos no solo, sua dissociação em água, bioacumulação, persistência e durabilidade no ambiente e no alvo. Em suma, quanto mais móvel e persistente uma molécula, maior seu potencial de percolação e lixiviação, consequentemente, maior a sua periculosidade de contaminação de águas subterrâneas, subsuperficiais e superficiais. Esta molécula torna-se mais agressiva ambientalmente se possuir elevado potencial de bioacumulação e baixa degradação no meio. Cabe salientar que o correto manejo dos agrotóxicos depende não somente do conhecimento de suas propriedades moleculares, mas de uma

Occurrence and diversity of Ralstonia solanacearum populations in Brazil / Ocorrência e diversidade de populações de Ralstonia solanacearum no Brasil

Ralstonia solanacearum is a gram-negative soil-borne bacterium capable of infection of hundreds of vegetable species over more than 50 botanical families, causing bacterial wilt, except for bananas, when the disease is called Moko. It deserves special attention, from all other plant pathogenic bacteria, for its high phenotypic and genotypic plasticity, a characteristic that makes disease control extremely difficult. In this context, frequent and necessary surveys are conduct in the attempt of characterizing the prevailing strains of R. solanacearum in each region where the disease has been reported. However, knowledge about occurrence and diversity of R. solanacearum in Brazil is fragmented and in some cases, based on inconclusive studies with few strains, little representative of a given region. The need to obtain a greater picture guided this review. The occurrence of this bacterium in Brazilian States and the possible causes for its dissemination are presented, with emphasis on studies of genetic variability of populations of R. solanacearum in the country. The compiled results report a wide distribution of the bacterium in Brazil and great variability of its populations among locations. Partly due to the difficulty of detecting small titer of bacteria in samples, paucity of information about the origin of inoculum in certain regions is observed, as well as the need for detecting the presence of the pathogen in asymptomatic plants, potato tubers with latent infections, soil, and water, which are the major causes of bacterial dissemination into areas without any disease history.

Ralstonia solanacearum é uma bactéria gram-negativa habitante do solo capaz de infectar centenas de espécies vegetais distribuídas em mais de 50 famílias botânicas, onde causa a murcha-bacteriana, exceto na bananeira, na qual recebe o nome de Moko. Destaca-se entre outras bactérias fitopatogênicas pela sua alta plasticidade fenotípica e genotípica, característica que contribui sobremaneira para dificultar o controle da doença. Nesse contexto, levantamentos frequentes e necessários são conduzidos na tentativa de caracterizar isolados de R. solanacearum prevalentes em cada região onde a doença tem sido relatada. No Brasil, o conhecimento sobre a ocorrência e a variabilidade de R. solanacearum está fragmentado e, em alguns casos, baseado em estudos inconclusivos pelo uso de amostras de isolados pouco representativas de uma região. A necessidade de agrupar essas informações norteou a presente revisão de literatura. A ocorrência da bactéria nos Estados brasileiros e as possíveis causas de sua disseminação são apresentadas, com ênfase nos estudos da variabilidade genética das populações de R. solanacearum no país de acordo com o atual esquema de classificação da bactéria. Os resultados de pesquisa compilados da literatura reportam ampla distribuição da bactéria no Brasil e grande variabilidade de suas populações entre locais. Em parte devido à dificuldade de detectar pequenos números de células bacterianas em amostras, nota-se escassez de informações sobre a origem do inóculo em determinadas regiões, bem como a necessidade de detectar a presença do patógeno em plantas assintomáticas, em tubérculos de batata com infecções latentes, no solo e na água, que são as principais causas da disseminação da bactéria para áreas sem histórico da doença.

Aplicações da cultura de tecidos vegetais em fruteiras do Cerrado / Applications of tissue culture techniques in Brazilian Cerrado fruit trees

Atualmente, percebe-se uma preocupação em relação às plantas do cerrado, com grande enfoque nas fruteiras em função de suas características e usos. Apesar de ser uma área ainda pouco explorada, é crescente o número de estudos dessas espécies nativas, dentre eles, os que abrangem as técnicas de cultura de tecidos. Isso se deve uma vez que essa ferramenta biotecnológica permite a propagação de espécies com dificuldade de germinação, minimiza o problema de sementes recalcitrantes, promove a produção de mudas em larga escala, complementa bancos de germoplasma e facilita as trocas de materiais genéticos. Dessa maneira, esta revisão visa a sumarizar o histórico e panorama atual das aplicações da cultura de tecidos em fruteiras do cerrado, proporcionando sustentação para novos estudos.

Currently, it's been given a huge concern to the cerrado plants, focusing on fruit trees due to their characteristics and uses. Despite being a fairly unexplored area, the number of studies on these native species has increased, especially those involving tissue culture techniques. That's because this biotechnological tool provides the propagation of species with germination difficulty, reduces problems of recalcitrant seeds, promotes large scale seedling production, complements germplasm banks and facilitates the exchange of genetic materials. Therefore, this review summarizes the history and current situation of tissue culture techniques applied to Brazilian Cerrado fruit trees, providing support to further studies.

Biotecnologia aplicada ao melhoramento genético do cafeeiro / Biotechnology applied to the genetic improvement of coffee plant

O melhoramento genético do cafeeiro mediante técnicas convencionais é trabalhoso e demorado. A biotecnologia oferece estratégias alternativas para auxiliar na multiplicação e no desenvolvimento de novas variedades com resistência a estresses bióticos e abióticos, melhor qualidade de bebida e maturação mais uniforme dos frutos. As técnicas de cultura de tecidos têm possibilitado a obtenção de grande número de plantas e a garantia da uniformidade genética do material. O emprego de marcadores moleculares, principalmente através da seleção assistida, facilitou o rápido progresso do melhoramento genético da cultura, assim como a transformação genética, via cultura e fusão de protoplastos, biobalística ou mediada por Agrobacterium sp. Esta revisão objetiva sumarizar o histórico, situação atual e perspectivas da biotecnologia no melhoramento genético do cafeeiro.

Genetic improvement of coffee through classical breeding is laborious and time consuming. Biotechnology offers alternative strategies to assist multiplication and development of new and improved coffee varieties, including those resistant to biotic and abiotic stresses, with better cup quality, and with uniform fruit maturation. Tissue culture techniques have enabled the production of a large number of plants with genetic uniformity. The use of molecular markers, especially through assisted selection, led to rapid progress of coffee plant breeding, as well as the use of genetic transformation by protoplasts culture and fusion, biobalistics, or Agrobacterium-mediated. This review provides a summary of biotechnology history, current situation and directions applied to the genetic improvement of coffee plant.

Fontes e proporção de material orgânico para a produção de mudas de cafeeiro em tubetes / Sources and proportions of organic components for production of coffee tree seedling (Coffea arabica L. ) in small plastic containers

Neste trabalho, objetivou-se avaliar a qualidade das mudas de cafeeiro (Coffea arabica L.) produzidas em tubetes com substrato artificial suplementado com fontes de material orgânico em diferentes proporções. O experimento foi conduzido sob delineamento experimental de blocos casualizados em esquema fatorial 3 x 6, com quatro repetições em parcelas formadas por seis tubetes. O primeiro fator correspondeu às fontes de material orgânico (esterco bovino, húmus de minhoca e cama de peru) e o segundo, suas proporções (0, 20, 40, 60, 80 e 100%) no substrato artificial (BioPlant-café) fertilizado com osmocote® (NPK 15-09-12). As características avaliadas foram: altura da muda, diâmetro de caule, número de pares de folhas, área foliar e massa seca da parte aérea e do sistema radicular. Pode-se concluir que o húmus de minhoca adicionado ao substrato artificial na proporção de 80% ou em uso exclusivo (100%) aumentou a área foliar das mudas de cafeeiro e, como conseqüência proporcionou um maior acúmulo de massa seca da parte aérea. O uso de esterco bovino (acima de 30%) e a cama de peru não alterou ou reduziu as características vegetativas das mudas de cafeeiro (altura da muda, diâmetro de caule, número de pares de folhas e área foliar) e diminuiu o acúmulo de massa seca.

This work aimed to evaluate the quality of coffee seedlings (Coffea arabica L.) produced in small plastic containers with artificial substrate supplemented with sources of organic components in different proportions. The experiment was carried out using the randomized block design, in a 3 x 6 factorial structure, with four replications in plots composed of small plastic containers. The first factor corresponded to the sources (cattle manure, earthworm casting, and turkey manure) and the second to the proportions (0, 20, 40, 60, 80, and 100%) in the artificial substrate (BioPlant-café®) fertilized with osmocote® (NPK 15-09-12). The characteristics evaluated were: seedling height, seedling stem diameter, number of pair of leaves, leaf area, shoot dry matter and root system dry matter. This work concluded that the earthworm casting added to the artificial substrate in proportion of 80% or by itself (100%) increases the leaf area of coffee seedlings and, as a consequence it provides a higher accumulation of dry matter in the shoot. The use of cattle (up to 30%) and turkey manure did not modify or reduced seedling height, seedling stem diameter, number of pair of leaves as well as the leaf area and decreased the accumulation of dry matter.